Η 25(OH)-D είναι μια προορμόνη που παράγεται στο ήπαρ με υδροξυλίωση της βιταμίνης D3 (χοληκαλσιφερόλη) από το ένζυμο cholecalciferol 25-hydroxylase. Οι γιατροί σε όλο τον κόσμο μετρούν αυτόν τον μεταβολίτη για να προσδιορίσουν την κατάσταση της βιταμίνης D ενός ασθενούς.